IPTG

Descripción

El IPTG es un inductor de la actividad de la β-galactosidasa en E. coli. Se utiliza comúnmente junto con X-GAL para detectar la expresión del gen lac en aplicaciones de clonación, lo que permite la detección de moléculas recombinantes.

Uso recomendado
El IPTG es un inductor de la actividad de la β-galactosidasa en E. coli. Se utiliza comúnmente junto con X-GAL para detectar la expresión del gen lac en aplicaciones de clonación, lo que permite la detección de moléculas recombinantes.

Prepare una solución madre de IPTG a 0,1 M (23,8 mg/mL) en agua destilada estéril y esterilícela por filtración con un filtro desechable de 0,22 micras. A cualquiera de las soluciones que se indican a continuación, añada 3 ml/L de la solución madre de IPTG. Al preparar las placas, añada 15 g de bacto-agar por litro.

Solución 1:10 x M9 Solución de sales: 60 g de Na₂HPO₄
30 g de KH₂PO₄
5 g de NaCl
10 g de NH₄Cl
Ajuste el pH a 7,4, añada agua hasta un volumen final de 1 L y esterilice en autoclave. Para el medio M9, añadir: 100 ml de solución salina 10x M9
1 ml de CaCl₂ 0,01 M
2 ml de MgSO₄ 1,0 M
Ajustar el volumen final a 1 litro con agua destilada. Complementar con (opcional): 0,2 % de aminoácidos de caseína
0,4 % de glucosa
40 mg/ml de tiamina-HCl

Solución 2:2 x medio YT: 16 g/L de triptona
10 g/L de extracto de levadura
5 g/L de NaCl